第一篇:沙盤實(shí)驗(yàn)個(gè)人總結(jié)
沙盤實(shí)驗(yàn)個(gè)人總結(jié)
剛聽(tīng)說(shuō)沙盤時(shí)很茫然,根本就不知道是什么意思,再加上看了一下有關(guān)知識(shí)的www.hmlawpc.coml或者1g待測(cè)樣品中菌落的個(gè)數(shù),一定要注意的是單位是cfu/ml或cfu/g。還有就是要掌握好對(duì)高壓蒸汽滅菌鍋的操作。實(shí)驗(yàn)之前要充分做好預(yù)習(xí)工作,以便實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。由于是測(cè)定微生物實(shí)驗(yàn),就要尤其小心其他雜菌的混入影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此要做好實(shí)驗(yàn)儀器和各種試劑的滅菌,有培養(yǎng)皿,試管,移液槍頭(裝在盒子中),按要求配置好的瓊脂培養(yǎng)基和生理鹽水,按各自要求用紗布和報(bào)紙包扎好,送入高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌。玻璃儀器在包扎前要進(jìn)行清洗,并烘干,以免水分沾濕報(bào)紙。滅完菌后取出物品進(jìn)入超凈工作臺(tái),超近工作臺(tái)的紫外燈在進(jìn)入20分鐘前開啟,并在進(jìn)入時(shí)關(guān)閉,以免影響人體。要對(duì)臺(tái)面進(jìn)行消毒處理,用酒精擦拭?梢栽诘却傊囵B(yǎng)基冷卻到50攝氏度左右前對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行10倍系列稀釋至需要的濃度。要注意的是一定要標(biāo)記好濃度或者按順序排列在試管架上以免弄混,同一個(gè)試管里吸取樣品才能用同一個(gè)槍頭進(jìn)行移液。再進(jìn)行平板接種。待瓊脂培養(yǎng)基冷卻好后,用右手打開紗布并將錐形瓶拿住,將瓶口靠近酒精燈再進(jìn)行滅菌,左手拿培養(yǎng)皿用大拇指和食指稍微打開培養(yǎng)皿蓋,將瓊脂培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中心內(nèi),不用倒很多,使瓊脂培養(yǎng)基沒(méi)過(guò)培養(yǎng)皿表面即可。培養(yǎng)皿一定是平拿在手上的,倒好后輕輕蓋上培養(yǎng)皿蓋,緩慢地平方在超凈工作臺(tái)臺(tái)面邊緣處,再推至中間。再用移液槍取1ml樣品快速打入培養(yǎng)皿中央,蓋上培養(yǎng)皿蓋,然后用手輕輕搖晃,千外不要太大力。然后貼上標(biāo)簽記號(hào),靜置。如此依次操作下去。靜置一段時(shí)間待培養(yǎng)基凝固后倒置放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)一段時(shí)間再取出進(jìn)行觀察計(jì)數(shù)。
我們組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不甚理想,培養(yǎng)皿中的微生物都是連成一片的,或者是培養(yǎng)皿壁上也都長(zhǎng)著,主要是由于待測(cè)樣品打入培養(yǎng)皿后,搖晃不均勻或者太大力了,以至于菌液沒(méi)分散開來(lái)或是跑到培養(yǎng)皿壁上去了。
第一個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作室下面四個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作基礎(chǔ);静僮鞑襟E都是相似的,只是待測(cè)微生物不同和根據(jù)不同微生物要配置不同的瓊脂培養(yǎng)基。
第二個(gè)實(shí)驗(yàn)是霉菌和酵母的檢查和計(jì)數(shù)。用到的培養(yǎng)基是馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基和孟加拉紅培養(yǎng)基,都是用于培養(yǎng)霉菌和酵母的。要注意的地方與第一個(gè)實(shí)驗(yàn)一樣是滅菌和避免引入雜菌,還有就是,混勻菌液時(shí)要慢慢地、輕輕地移動(dòng)培養(yǎng)皿。這個(gè)實(shí)驗(yàn)有兩個(gè)菌要觀察,不過(guò)由于兩個(gè)菌的菌落形態(tài)差異比較大,所以還是比較簡(jiǎn)單就能識(shí)別的:
孟加拉紅培養(yǎng)基中,菌落的紅色比培養(yǎng)基的紅色顏色更重,菌落顏色是大紅色,培養(yǎng)基顏色是粉紅色。在孟加拉紅培養(yǎng)基表面的酵母菌菌落是圓形,邊緣整齊,表面比較光滑濕潤(rùn),形態(tài)較小。位于孟加拉紅培養(yǎng)基內(nèi)的菌落則是三角形和四角形,還有多角形。邊緣都是整齊的,不像霉菌菌落的邊緣有菌絲。霉菌形成的菌落較稀松,多成絨毛狀,絮狀,形態(tài)與酵母相比較大。
第三個(gè)實(shí)驗(yàn)是乳酸菌的檢驗(yàn)。用到的培養(yǎng)基是mrs培養(yǎng)基、莫匹羅星鋰鹽改良 mrs 培養(yǎng)基和mc 培養(yǎng)基,mrs培養(yǎng)基培養(yǎng)的是乳酸菌,莫匹羅星鋰鹽改良 mrs 培養(yǎng)基培養(yǎng)的是雙歧桿菌,mc 培養(yǎng)基培養(yǎng)的是嗜熱鏈球菌。乳酸菌總數(shù)結(jié)果減去雙歧桿菌與嗜熱鏈球菌計(jì)數(shù)結(jié)果之和即得乳桿菌計(jì)數(shù)。
要注意的是該實(shí)驗(yàn)用的是平板涂布法接種,是待培養(yǎng)基凝固后吸取1ml酸奶樣品稀釋勻液,用無(wú)菌涂布棒涂抹均勻。倒置培養(yǎng)一段時(shí)間,觀察菌落形態(tài)及計(jì)數(shù)菌落。由于乳酸菌和雙歧桿菌都是需要厭氧培養(yǎng)的,所以要求從樣品稀釋到平板涂布要求在15分鐘內(nèi)完成。
第四個(gè)實(shí)驗(yàn)是微生物藥敏試驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)主要用了2種方法:紙片擴(kuò)散法和牛津杯法。紙片擴(kuò)散法是將含有定量抗菌藥物的濾紙片貼在已接種了測(cè)試菌的瓊脂表面上,紙片中的藥物在瓊脂中擴(kuò)散,隨著擴(kuò)散距離的增加,抗菌藥物的濃度呈對(duì)數(shù)減少,從而在紙片的周圍形成濃度梯度。同時(shí),紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的菌株不能生長(zhǎng),而抑菌范圍外的菌株則可以生長(zhǎng),從而在紙片的周圍形成透明的抑菌圈,不同的抑菌藥物的抑菌圈直徑因受藥物在瓊脂中擴(kuò)散速度的影響而可能不同,抑菌圈的大小可以反映測(cè)試菌對(duì)藥物的敏感程度,并與該藥物對(duì)測(cè)試菌的最小抑菌濃度(mic)呈負(fù)相關(guān)。牛津杯法加的是試劑,卡那霉素試劑和醫(yī)用酒精,查看它們對(duì)細(xì)菌的抑菌效果。
要注意2種方法都需要空白對(duì)照試驗(yàn)實(shí)驗(yàn),前者為不加任何東西的滅菌小圓濾紙片,后者為無(wú)菌水。用的也是平板涂布法接種。1法:鑷子在夾有抗菌物質(zhì)的紙片和不加任何東西的滅菌小圓濾紙片時(shí)都要進(jìn)行酒精燈滅菌,以免影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確度。2法:在涂布好的培養(yǎng)基表面用鑷子輕輕置滅好菌的牛津杯。注意不用按壓的,不然擠壓會(huì)致培養(yǎng)基表面破裂,會(huì)影
響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。待培養(yǎng)好后取出觀察并測(cè)量抑菌圈直徑,結(jié)果單位用毫米計(jì)。
第五個(gè)實(shí)驗(yàn)是自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響。選取3個(gè)環(huán)境因素物理、化學(xué)和生物因素均可進(jìn)行設(shè)計(jì)。根據(jù)前四個(gè)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),通過(guò)小組探討和交流設(shè)計(jì)出實(shí)驗(yàn)方案。并加以驗(yàn)證。通過(guò)自主設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)可以結(jié)合小組的智慧,加強(qiáng)團(tuán)隊(duì)協(xié)作精神和創(chuàng)新思維,通過(guò)實(shí)驗(yàn)可以驗(yàn)證理論,增加感性認(rèn)識(shí),培養(yǎng)獨(dú)立工作能力和思考能力,并使具有過(guò)硬的專業(yè)技術(shù)水平。
通過(guò)這次的實(shí)驗(yàn),我明白了任何事情丟不是一蹴而就的,而是一個(gè)慢慢積累的過(guò)程。雖然實(shí)驗(yàn)結(jié)果不是很理想,但是我參與了過(guò)程,通過(guò)小組討論我們也分析了失敗的原因,找到了解決的方法,避免了下一次失誤。并且從中理解了團(tuán)隊(duì)討論和合作的重要性。以上即是我的全部感想。
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