實驗動物的微生物學和寄生蟲學總結(jié)

實驗動物的微生物學、寄生蟲學質(zhì)量監(jiān)測

監(jiān)測方法:寄生蟲GB/T18448細菌GB/T14926

我國實驗的質(zhì)量保障體系1實驗動物許可證2種子種源基地3質(zhì)量監(jiān)測

4社會化生產(chǎn)供應

感染的危害:

感染的危害威脅人類健康影響動物生產(chǎn)影響實驗結(jié)果污染實驗材料

寄生蟲對實驗動物的影響

實驗動物標準1環(huán)境設施2動物質(zhì)量3動物遺傳

4營養(yǎng)和飼料,籠具

檢測頻率

普通級動物：每三個月至少檢測動物一次。清潔級動物：每三個月至少檢測動物一次

無特定病原體動物：每三個月至少檢測動物一次

無菌動物：每年檢測動物一次。每2-4周檢查一次動物的生活環(huán)境標本和糞便標本。

實驗動物主要疫病及人獸共患傳染病

1流行性出血熱（EHF）臨床表現(xiàn)：發(fā)熱、出血和腎臟損害布尼亞病毒科，漢坦病毒屬為吸入型感染和接觸型感染特點：對脂溶劑敏感；

PH5.0以下，60℃，1h可使其全部殺死；紫外線照射30分鐘滅活病毒預防與控制

防止野鼠進入設施；

實驗大、小鼠群定期進行血清學檢測；

加強實驗室管理，防止飼料、墊料等被野鼠污染。飼養(yǎng)人員和實驗人員應加強防護措施，定期體檢。

2淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒（LCMV）：侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng)，呈現(xiàn)腦脊髓炎癥狀。感染后目前還無法治療。為砂粒病毒科、砂粒病毒屬

特點：乙醚和去污劑敏感；

不耐熱，56℃20min即可滅活；紫外線也可將其滅活臨床癥狀和病理變化

人感染后可引起流感樣癥狀或腦膜炎。小鼠帶毒后可表現(xiàn)為無癥狀的帶毒者。

小鼠感染LCMV依年齡、感染途徑及其他因素的不同，可表現(xiàn)為腦型、內(nèi)臟型和遲發(fā)型三種類型發(fā)現(xiàn)小鼠已被感染，應將小鼠全部淘汰，房舍徹底消毒后，重新引種，建立新種群

3狂犬病：典型的病理變化為化膿性腦炎彈狀病毒科，狂犬病毒屬

特點：酸、堿、石炭酸、新潔爾滅、甲醛、升汞等消毒液敏感。

能被日光、紫外線、超聲波、1%～2%肥皂水、70%乙醇、0.01%碘液、丙酮、乙醚等滅活臨床癥狀和病理變化

分為狂暴型和麻痹型�？癖┬头�3期，即前驅(qū)期、興奮期和麻痹期。

麻痹型犬始見于頭部肌肉，表現(xiàn)吞咽困難，隨后四肢麻痹，最終全身麻痹而死亡

4猴逆轉(zhuǎn)錄病毒包括4種病毒：猴逆轉(zhuǎn)D型病毒（SimianretrovirusD,SRV）、猴免疫缺陷病毒（Simianimmunodeficiencyvirus,SIV）、猴T細胞趨向性病毒1型（SimianTlymphotropic,STLV-1）、泡沫病毒（Simianfoamyvirus,SFV）。

5弓形體生活史：5個形態(tài)階段：速殖子、包囊、裂殖體、配子體和卵囊。

發(fā)育過程需兩個宿主，小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、犬和猴為中間宿主，貓為終末宿主。

6鼠痘病毒（MousePoxVirus）感染實驗小鼠引起的一種烈性傳染病。

臨床表現(xiàn)為全身或局部皮膚痘疹，四肢、尾和頭部腫脹、潰爛、壞死甚至腳趾脫落為特征，故又稱為傳染性脫腳病。多呈暴發(fā)性流行，致死率較高，危害極大。痘病毒科，痘病毒亞科，正痘病毒屬特點：對干燥、低溫抵抗力較強，

在潮濕環(huán)境下60℃10分鐘即可滅活。氧化劑、次氯酸鹽和氯化錳能滅活病毒。0.2%甲醛可破壞病毒的傳染性臨床上分為三種病型。

急性致死型：多見于初次發(fā)病的鼠群，于4-12小時死亡。病理變化可見肝壞死嚴重，脾、腸也可見到壞死灶。亞急性型-慢性經(jīng)過型：可見典型的缺腳畸形癥狀，病理變化可見脾臟腫大和淋巴結(jié)腫大，皮膚炎性水腫、壞死。無癥狀耐過型：動物外觀健康無病變，但在小鼠體內(nèi)有病毒增殖，成為帶毒動物。

7小鼠肝炎病毒：臨床表現(xiàn)為肝炎、腦炎和腸炎為冠狀病毒科、冠狀病毒屬特點：對酸穩(wěn)定，

不同毒株對熱的穩(wěn)定性不同，

低毒力毒株和對熱穩(wěn)定的毒株是實驗鼠群最嚴重的污染物鼠群一旦感染，必須淘汰整個鼠群。

8小鼠仙臺病毒：副粘病毒科，副粘病毒屬特點：對乙醚及熱敏感；

pH3.0條件下極易滅活。一旦感染，淘汰感染鼠群

9兔出血癥病毒（RHDV）：細小病毒科，細小病毒屬特點：對氯仿和乙醚不敏感，能耐酸；

紫外線和干燥等不良環(huán)境的抵抗力較強。

1%氫氧化鈉4小時、1%-2%甲醛、1%漂白粉3小時才被滅活。實驗動物微生物感染的影響

直接影響：

（1）引起人畜共患病，影響工作人員的身體健康。

（2）引起動物傳染病，影響均衡生產(chǎn)，影響動物健康和質(zhì)量。（3）嚴重干擾實驗結(jié)果的可靠性、準確性、重復性。（4）污染環(huán)境

間接影響：

（1）引用不正確的實驗結(jié)果可能會導致臨床的錯誤治療。（2）用不健康的動物材料制成生物制品可擴散疾病。（3）重復實驗可造成新的人力、物力、才力的浪費。

實驗動物防疫1防疫原則

2傳染病流行的基本環(huán)節(jié)3防疫措施

實驗動物防疫原則？

1．隔離飼養(yǎng)：不同種動物要分開飼養(yǎng)，嚴禁混養(yǎng)在一起。防止交叉感染。

2．引進動物要嚴格檢疫：依據(jù)國家檢測標準進行，嚴格檢疫。要從具有質(zhì)量合格證的單位引進動物。3．堅持衛(wèi)生消毒制度：杜絕各種病原微生物的侵入和繁殖。要定期對動物房舍和飼養(yǎng)用具進行消毒。4．人員健康檢查：飼養(yǎng)管理人員要定期進行健康檢查，有人畜共患病者，應調(diào)離與動物接觸的工作崗位。5．動物質(zhì)量檢查：保種單位、生產(chǎn)單位要對飼養(yǎng)的動物定期進行質(zhì)量檢查，發(fā)現(xiàn)問題及時更新種群。6．動物免疫制度：對國家標準要求必須實施預防接種的實驗動物要定期進行免疫接種。7．隔離和無害化處理：嚴格防止野生動物進入實驗動物室，對死亡動物進行無害化

傳染病流行的基本環(huán)節(jié)？

1.傳染源：主要是患病動物（潛伏期、發(fā)病期和恢復期動物）和攜帶病原體動物、野鼠等。實驗動物的分泌物及排泄物污染的設施、墊料、飼料、飲水、空氣、用具等都是病原體傳播的媒介。2.傳播途徑：（1）直接傳染直接接觸傳染包括水平傳播、垂直傳播（2）間接傳播：通過媒介傳播。包括非生物性傳播如空氣飛沫、塵埃等。生物性傳播包括節(jié)肢動物（蒼蠅、蚊子等）；野生動物如野生嚙齒類動物等；患病的實驗動物；飼養(yǎng)、實驗人員不注意衛(wèi)生防疫傳染病原體。

3.易感動物要做好實驗動物的衛(wèi)生防疫，就要徹底控制以上三個流行環(huán)節(jié)

動物傳染病防制的具體措施？

1、根據(jù)不同等級的實驗動物分別制定科學的飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生防疫制度，并嚴格執(zhí)行。

2、根據(jù)不同等級的實驗動物的要求建立合理的環(huán)境設施，嚴格區(qū)分實驗動物繁育區(qū)與動物實驗區(qū)，且各種動物要分開飼養(yǎng)，以防交叉感染。

3、堅持平時的各項衛(wèi)生消毒滅菌制度，對實驗動物的房舍、用具等定期進行消毒或滅菌，杜絕各種微生物的侵入。4、自繁自養(yǎng)自用，引進的動物只有確認健康后才能與原設施內(nèi)動物合群或投入使用；不得從疫區(qū)引進動物。5、外環(huán)境定期進行殺鼠滅蠅的工作，防止野生動物和昆蟲進入動物飼養(yǎng)室或動物實驗室。6、工作人員定期進行健康檢查，患有傳染性疾病的人員不能從事實驗動物工作。

7、發(fā)現(xiàn)疫情及時上報，迅速隔離患病動物，危害性大的疫病采取封鎖、撲殺等綜合性措施，將患病動物進行焚燒，污染的環(huán)境及用具應進行徹底嚴密的消毒或滅菌。

8、開展經(jīng)常性的衛(wèi)生檢疫，發(fā)現(xiàn)疫情，及時采取相應的防治措施。

人獸共患傳染病:流行性出血熱淋巴細胞脈絡叢腦膜炎狂犬病B病毒猴逆轉(zhuǎn)錄病毒弓形體鉤端螺旋體結(jié)核病

動物烈性傳染病:鼠痘小鼠肝炎仙臺病毒兔出血熱

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一、名詞解釋

1、病毒的基本特征：①病毒只含有一種核酸，DNA或RNA。②嚴格的細胞內(nèi)寄生，沒有完整的酶系統(tǒng)，不能獨立進行生長和繁殖。③無合成蛋白質(zhì)所必需的酶，必須利用宿主細胞的酶及其他物質(zhì)。④對一般抗生素不敏感，但對干擾素敏感。

2、致病菌：引起動物疾病，嚴重危害動物健康的細菌，如沙門氏菌、志賀氏菌、巴氏桿菌、鼠棒狀桿菌等。

3、條件致病菌：一般不引起動物發(fā)病，但在應激條件下，機體免疫力降低時，可引起動物的疾病的細菌，如綠膿桿菌、金黃色葡萄球茵引發(fā)動物的菌血癥和體表膿腫等。

4、正常菌群：對動物無致病作用，在一般情況下對機體產(chǎn)生有益的生理作用的細菌，如普通大腸桿菌、乳酸桿茵等。

5、寄生蟲的傳播媒介：指在脊椎動物宿主間傳播寄生蟲的一種低等動物，如傳播血液原蟲的吸血節(jié)肢動物。

6、普通動物（CV）：是在微生物學控制上要求最低的動物，它要求不攜帶人畜共患病和動物烈性傳染病的病原。該種動物飼養(yǎng)于普通環(huán)境中。

7、清潔動物：是一類除了普通動物應排除的病原體外，尚不能攜帶對動物危害大和對科學研究干擾大的病原體的動物。

8、SPF動物：是指動物體內(nèi)無特定的微生物和寄生蟲存在的動物，除普通級和清潔級必須排除的微生物和寄生蟲外，SPF級動物還必須排除對實驗有干擾的微生物和寄生蟲。9、無菌動物（GF）：是指用現(xiàn)有的檢測技術(shù)在動物體內(nèi)外的任何部位均檢不出任何微生物和寄生蟲的動物。10、悉生動物（GN）：又叫已知菌動物或己知菌叢動物，是指在無菌動物體內(nèi)植入一種或幾種己知微生物的動物。

二、是非題（下列試題中正確的用（√）號錯誤的用（X）號）

l、犬普通級必須排除狂犬病毒、犬細小病毒、犬瘟熱病毒、大傳染性肝炎病毒，且必須對狗做這四種病毒疫苗的預防接種。（√）2、犬普通級必須排除狂犬病毒、犬細小病毒、犬瘟熱病毒、犬傳染性肝炎病毒，且血液中不能有這四種病毒的抗體。（X）3、猴普通級必須排除B病毒。（√）4、猴普通級必須排除狂犬病毒。（X）

5、病原真菌多為人畜共患，且真菌孢子即易飛揚，污染環(huán)境威脅實驗人員的健康。（√）6、病原真菌面廣量大，但對人沒有很大威脅。（X）

7、高熱滅菌可分為干熱滅菌法和濕熱滅菌法，干熱滅菌效力更強。（X）8、高熱滅菌可分為干熱滅菌法和濕熱滅菌法，濕熱滅菌效力更強。（√）9、霉菌和酵母對營養(yǎng)要求均較低，可在簡單的沙氏培養(yǎng)基上良好地生長。（√）10、霉菌和酵母對營養(yǎng)要求均較高，能在營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基上良好地生長。（X）11、能以有性（如孢子）或無性（芽生、裂殖等）方式繁殖的微生物是真菌。（√）12、能以有性（如抱子）或無性（芽生、裂殖等）方式繁殖的微生物是細菌。（X）13、真菌能在飼料中繁殖，產(chǎn)生危害動物的代謝產(chǎn)物，稱之為真菌毒素。（√）

14、疥螨在宿主皮膚的淺層挖掘隧道，在隧道中生活，這種寄生蟲稱為體外寄生蟲。（√）三、選擇題（請選擇ABCD中的一項）

1、對自然宿主、人和其他動物均有較強的致病性的人畜共患病原A。

A狂犬病病毒B兔出血癥病毒C小鼠肝炎病毒D雞白血病病毒2、對自然宿主致病性弱，但可引起人的致死性感染的病毒是D

A小鼠脫腳病病毒B免出血癥病毒C小鼠肝炎病毒D流行性出血熱病毒3、下列病原體中對人和動物均有較強致病性的人畜共患的病原體是A。A淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒B鼠痘病毒C仙臺病毒D猴病毒404、自然宿主致病力強，常引起爆發(fā)流行，甚至毀滅整個動物群的病原體是B。A猴病毒40B兔出血癥病毒C小鼠肝炎病毒D雞白血病病毒

5、自然宿主致病力強，常引起爆發(fā)流行，甚至毀滅整個動物群的病原體是B。

A淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒B鼠痘病毒C仙臺病毒D猴病毒40

6、對自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影響動物的健康，并對研究工作產(chǎn)生嚴重干擾的病原體是C

A狂犬病病毒B兔出血癥病毒C小鼠肝炎病毒D雞白血病病毒

7、對自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影響動物的健康并對研究工作產(chǎn)生嚴重干擾的病原體是C。

A淋巴細胞脈絡從腦膜炎病毒B鼠痘病毒C仙臺病毒D猴病毒40

8、對自然宿主、人和其它動物都無明顯的致病性，但可污染生物制劑。腫瘤移植物和細胞培養(yǎng)物的病原體是D。

A淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒B鼠痘病毒C仙臺病毒D猴病毒409、下列病原體中對人和動物均有較強致病性、人畜共患的病原體是A。

A沙門氏菌B泰澤氏菌C鼠支原體D松鼠狼瘡疹病毒

10、對自然宿主致病力強，常引起爆發(fā)流行，甚至毀滅整個動物群的病原體是B。A出血熱病毒B泰澤氏菌C小鼠支原體D松鼠猴瘧疾病毒

11、對自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影響動物的健康并對研究工作產(chǎn)生嚴重干擾的病原體是C。

A出血熱病毒B泰澤氏菌C鼠支原體D松鼠狼瘡疹病毒

12、對自然宿主無明顯的致病性，但可傳染給人引起致死性感染的病原體是D。A結(jié)核分枝桿菌B多殺性巴氏桿菌C鼠支原體D猴瘡疹病毒（B病毒）13、對自然宿主無明顯的致病性，但可傳染給人引起致死性感染的病原體是D。A結(jié)核分枝桿菌B多殺性巳氏桿菌C鼠支原體D流行性出血熱病毒14、小鼠普通級動物必須排除的細菌是D。

A肺炎克雷伯氏菌B肺支原體C多殺巴氏桿菌D沙門氏菌

15、對自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影響動物的健康，并對研究工作產(chǎn)生嚴重干擾的病原體屬小鼠清潔級動物必須排除的細菌是B。

A肺炎克雷伯氏菌B肺支原體C金黃色葡萄球菌D沙門氏菌

16、對自然宿主、人和其它動物都無明顯的致病性，但屬條件性致病菌，無特定病原體級動物必須排除的細菌是A。

A肺炎克雷伯氏菌B肺支原體C多殺巴氏桿菌D沙門氏菌

17、對自然宿主、人和其它動物都無明顯的致病性，但屬條件性致病菌，小鼠無特定病原體級動物必須排除的細菌是A。

A綠膿桿菌B肺支原體C多殺巴氏桿菌D沙門氏菌

18、小鼠普通級動物必須排除的細菌是D。

A肺炎克雷伯氏菌B肺支原體C多殺巴氏桿菌D皮膚病原真菌

19、對自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影響動物的健康，并對研究工作產(chǎn)生嚴重干擾的病原體屬小鼠清潔級動物必須排除的細菌是C。

A肺炎克雷伯氏菌B金黃色葡萄球菌C多殺巴氏桿菌D沙門氏菌20、小鼠普通級動物必須排除的病毒是D。

A仙臺病毒B小鼠細小病毒C小鼠肺炎病毒D淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒21、對自然宿主、人和其它動物都無明顯的致病性，但可污染生物制劑、腫瘤移植物和細胞培養(yǎng)物的病原體，屬小鼠無特定病原體級動物必須排除的病毒是B

A仙臺病毒B小鼠細小病毒C小鼠脫腳病病毒D淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒22、小鼠普通級動物必須排除的病毒是D。

A仙臺病毒B小鼠細小病毒C小鼠肺炎病毒D小鼠脫腳病病毒

23、對自然宿主有一定的致病性，可引起疾病流行，影響動物的健康，并對研究工作產(chǎn)生嚴重干擾的病原體屬小鼠清潔級動物必須排除的病毒是A。

A小鼠肝炎病毒B小鼠細小病毒C小鼠肺炎病毒D小鼠肺炎病毒24、小鼠普通級動物必須排除的病毒是D

A仙臺病毒B小鼠細小病毒C小鼠肺炎病毒D流行性出血熱病毒25、兔普通級動物必須排除的病毒是D

A仙臺病毒B兔粘液瘤病毒C輪狀病毒D兔出血癥病毒26、普通級兔必須排除的細菌是D。

A肺炎克雷伯氏菌B肺支原體C多殺巴氏桿菌D皮膚病原真菌27、普通級兔必須排除的細菌是D。

A綠膿桿菌B肺支原體C多殺巴氏桿菌D沙門氏菌28、普通級嚙齒類動物和兔必須排除的寄生蟲是A。

A體外寄生蟲B兔腦胞內(nèi)原蟲C卡氏肺抱子蟲D栓尾線蟲29、普通級嚙齒類動物和兔必須排除的寄生蟲是A。

A弓形體B腦胞內(nèi)原蟲C卡氏肺抱子蟲D栓尾線蟲四、填空題

l、病原真菌根據(jù)其侵襲部位以及發(fā)病的條件，大體劃分為淺部真菌、深部真菌和條件致病真菌三類。

2、實驗動物寄生蟲感染的來源主要是被污染的墊料、水、飼料以及中間宿主和傳播媒介。3、寄生蟲的綜合防治措施主要包括以下三個方面即驅(qū)蟲、環(huán)境衛(wèi)生和管理制度。五、問答題

l、確診病毒的存在的主要依據(jù)是什么？

答：在細胞培養(yǎng)或病變組織的切片中檢查到包涵體；接種于動物、雞胚或細胞，動物發(fā)病，雞胚死亡，在雞胚組織、絨毛尿囊膜上出現(xiàn)可見病變，用血清學方法可探測到病毒存在：應用熒光抗體技術(shù)或免疫電鏡技術(shù)，證明某病毒的存在；應用血清學方法檢測證明病毒的存在。2、細菌的生長繁殖需要什么條件？

答：①營養(yǎng)條件：細菌的生長繁殖要求一系列營養(yǎng)成分，如水分。含碳化合物、含氮化合物、礦物質(zhì)和必需的生長因子等。②溫度：細菌生長有最適溫度和溫度范圍，超過最高或低于最低溫度范圍，細菌的活動和生長均告停止。一般病原菌的最適溫度與人畜的體溫相近似。③氫離子濃度（PH）：PH對細菌生長的影響很大，多數(shù)病原菌生長的最適PH為7.2-7.6。④滲透壓：細菌細胞需要在適宜的滲透壓下，才能生長與繁殖。⑤氣體：氧氣和二氧化碳的濃度對細菌的發(fā)育和繁殖有明顯的影響。

3、微生物和寄生蟲對被感染的實驗動物的主要危害是什么？

答：攜帶人畜共患病的病原體，能直接威脅人類和動物的健康；烈性傳染病不僅會導致整個動物群的毀滅，也能使整個動物群帶毒，帶毒群體難以凈化，會反復爆發(fā)疾病，造成生產(chǎn)和研究的巨大損失；干擾實驗結(jié)果，如導致實驗中止、重復性差、或結(jié)果無法解釋，造成人力、物力和時間的極大浪費：污染生物制品，生物制品帶毒造成疫病蔓延，帶毒的生物材料使腫瘤移植失敗、細胞培養(yǎng)污染、胚胎操作與動物胚胎工程無法正常進行

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