微生物學(xué)實習(xí)報告

微生物學(xué)實習(xí)報告

姓名：余洋專業(yè)：臨床日期：201*/10/12成績：合作者：金澤健陳錦超顯微鏡號：實驗室：第一實驗室教師姓名：

無菌操作技術(shù)

【摘要】無菌操作技術(shù)是整個微生物實驗的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，無菌操作技術(shù)掌握的熟練程度直接影響著以后整個實驗過程。為了認識無菌操作的重要意義，學(xué)習(xí)基本的無菌技術(shù)。我們通過實驗室空氣微生物學(xué)檢查，手上細菌的接種和培養(yǎng)，紫外線殺菌試驗來熟悉無菌操作技術(shù)。

實驗結(jié)果表明：1)培養(yǎng)皿在空氣中暴露的時間越長，培養(yǎng)皿上形成的菌

落就越多。2)由于洗手后未擦干所形成的培養(yǎng)皿上的菌落數(shù)比未洗手造成的菌落多。3)照射紫外線的部分菌落數(shù)為0，而未照射部分有大量菌落形成�！娟P(guān)鍵詞】無菌操作；空氣沉降；紫外線殺菌；細菌的接種引言

醫(yī)學(xué)微生物的實驗操作對象大多為致病的微生物。由于各種微生物的致病力與傳染途徑不同，故對不同微生物實驗操作也不同。作為實驗者必須嚴格遵守實驗操作規(guī)則，精益求精把握好實驗中的一些細節(jié)問題。既要防止自身感染。又要杜絕將病原微生物散布于實驗室外的一切可能，而無菌操作技術(shù)就是實驗成功和防止感染的保證。

本實驗結(jié)合微生物學(xué)實驗課“可觀測性”的特點，結(jié)合三個實驗進行細菌形態(tài)觀察，向?qū)W生介紹肉眼可見的細菌菌落。使同學(xué)對工作環(huán)境無菌及無菌操作在微生物實驗中的重要作用加深了解。實驗材料和方法1.實驗儀器和材料

儀器：接種環(huán)、載玻片、酒精燈、培養(yǎng)皿等

材料：SE菌和E.coli，空氣及手上細菌2．實驗步驟

⑴實驗室空氣微生物學(xué)檢查：

采用自然沉降法檢查空氣中的細菌。取普通培養(yǎng)基8個，將蓋打開，分別暴露空氣5，10，15，20，25，30，35，40分鐘，然后蓋上蓋，于平板底部貼上標簽，置37℃溫箱培養(yǎng)，觀察菌落生長情況。⑵手上細菌的接種培養(yǎng)：

取普通培養(yǎng)基一個，用筆在培養(yǎng)基的底部劃線成2等份。并編號1、2（洗手和不洗手）。在無菌間或酒精燈旁進行，先用右手食指涂1號格，再將右手食指用自來水清洗后涂2號格。于37℃培養(yǎng)后結(jié)果觀察。⑶紫外線殺菌試驗：

取普通培養(yǎng)基一個，用筆在培養(yǎng)基的底部劃線成2等份。并編號1、2。以無菌操作【1】的手法，用接種環(huán)分別接種SE菌和E.coli到1，2部分。

將接種好的培養(yǎng)皿半開放置紫外燈下照射40分鐘。蓋上培養(yǎng)皿蓋，放37℃溫箱中培養(yǎng)。觀察結(jié)果，從培養(yǎng)箱中取出培養(yǎng)皿，觀察其上細菌生長情況，從菌苔特點判斷是否有雜菌污染，以判斷無菌操作是否合格。

微生物學(xué)實習(xí)報告

姓名：余洋專業(yè)：臨床日期：201*/10/12成績：合作者：金澤健陳錦超顯微鏡號：實驗室：第一實驗室教師姓名：

試驗結(jié)果

1.實驗室空氣微生物學(xué)檢查

不同曝露時間培養(yǎng)皿中菌落生長情況編號1234曝露時間（min）菌落數(shù)511015205256784030352.手上細菌的接種培養(yǎng)從培養(yǎng)皿上看，洗手后未擦干所形成的培養(yǎng)皿上的菌落數(shù)比未洗手造成的菌落多。

3.紫外線殺菌試驗

培養(yǎng)皿上各處細菌菌落生長情況編號1（前半部分）1（后半部分）2（前）2（后）直接紫外光照有無有無菌落無有無有討論

1.實驗室空氣微生物學(xué)檢查

空氣不是微生物存在的自然環(huán)境，但空氣中帶有細菌也常是培養(yǎng)基制備污染的來源。實驗室內(nèi)學(xué)生多，大聲說話，咳嗽由上呼吸道噴出的微生物可播散到空氣中。空氣中的細菌在重力的作用下不斷向下沉降，降落到培養(yǎng)皿中，曝露時間也長，培養(yǎng)皿中降落的細菌也越多，因此形成的菌落也越多。2.手上細菌的接種培養(yǎng)

洗手后未擦干所形成的培養(yǎng)皿上的菌落數(shù)比未洗手造成的菌落多。可能原因是由于只用自來水洗而且未擦干，可能并未洗掉手上的細菌，反而帶來了大量水中的雜菌。且手上的水在劃線時也沾染到培養(yǎng)基上，增加了水分，可能使培養(yǎng)環(huán)境更適合細菌生長。3.紫外線殺菌試驗

紫外線消毒在臨床上常用，但其穿透力弱，不宜透過普通玻璃、紙張、塵埃等。因此直接照射紫外線的細菌死亡，培養(yǎng)基上沒有菌落出現(xiàn)。而有玻璃蓋阻擋的部分菌落生長良好。

（另：結(jié)合其他組數(shù)據(jù)可知：紫外線照射時間越長，菌落數(shù)越少，滅菌效果越好。）

實驗不足

在實驗方案設(shè)計上，實驗2中應(yīng)該添加上洗手后擦干的操作，而且最好都用洗手液洗。

另外結(jié)果記錄中應(yīng)該添加上別組數(shù)據(jù)，研究不同曝光時間下紫外線殺菌效果。由于數(shù)據(jù)不方便收集只能放棄。

微生物學(xué)實習(xí)報告

姓名：余洋專業(yè)：臨床日期：201*/10/12成績：合作者：金澤健陳錦超顯微鏡號：實驗室：第一實驗室教師姓名：

注意事項

1.熱的接種環(huán)應(yīng)在培養(yǎng)基無菌生長區(qū)稍加降溫后，再刮取細菌。否則易損傷細菌且易產(chǎn)生微生物氣溶膠引起感染。2.細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)皿應(yīng)底部朝上倒置放在培養(yǎng)箱中。因為皿蓋朝上正向放置時，37℃條件下培養(yǎng)基中水分揮發(fā)可凝集在皿蓋上，形成液滴，液滴滴落在瓊脂表面，易引起培養(yǎng)物污染或單菌落連接在一起成片生長。

參考文獻：

【1】《醫(yī)學(xué)免疫學(xué)與病原生物學(xué)實驗教程》，王月丹主編，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，201*年。附錄

【1】無菌操作技：用接種環(huán)取菌時，先將接種環(huán)以45度角插入酒精燈火焰的內(nèi)焰處燒灼片刻，再移至外焰燒灼片刻，之后將接種環(huán)橫過來水平移動，燒灼全部鎳鉻絲部分。以無菌操作手法打開培養(yǎng)物，將燒灼滅菌的接種環(huán)在瓊脂表面或試管壁上冷卻6~8秒，取少許菌苔或菌液，同樣以無菌操作的手法接種至新鮮培養(yǎng)基內(nèi)。取菌時如果接種環(huán)過熱，接觸菌液或菌苔時易產(chǎn)生感染性氣溶膠，引起自身感染或污染環(huán)境，也會殺死菌種。接種應(yīng)在火焰附近進行，蘸有細菌的接種環(huán)不能碰觸衣物和操作臺等其它物品。接種結(jié)束要立即將染菌金屬絲用火焰滅菌，并將接種柄置于接種架上。所有無菌操作完畢，應(yīng)將帶有細菌物品妥善處理，并將其空間進行紫外線消毒。

擴展閱讀：微生物學(xué)實訓(xùn)報告的書寫

廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院微生物與免疫學(xué)實訓(xùn)報告班級：學(xué)號：姓名：日期：實訓(xùn)一普通光學(xué)顯微鏡的使用及真菌的形態(tài)觀察一、實訓(xùn)目的：1.了解普通光學(xué)顯微鏡構(gòu)造及原理；

2.掌握顯微鏡的使用方法；3.認識真菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

二、實訓(xùn)原理（簡潔明了）：顯微鏡的構(gòu)造（油鏡的原理不用寫）三、儀器與試劑：

標本片：酵母菌裝片、曲霉裝片、青霉裝片、根霉裝片四、實訓(xùn)方法

1、實訓(xùn)步驟（簡明清晰）：顯微鏡的使用方法（低倍及高倍）2、操作關(guān)鍵點：

3、可能存在問題及解決方案：

五、實訓(xùn)結(jié)果（任意兩張片）40分/片標本名稱放大倍數(shù)教師評分六、思考題:1七、實訓(xùn)總結(jié)：（實訓(xùn)結(jié)束后完成）

分析實訓(xùn)過程的收獲、存在的問題和解決的方法

廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院微生物與免疫學(xué)實訓(xùn)報告班級：學(xué)號：姓名：日期：

實訓(xùn)二油鏡的使用及細菌的形態(tài)觀察

一、實訓(xùn)目的：1.掌握油鏡的原理、使用方法及其維護保養(yǎng)方法；

2.認識細菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

二、實訓(xùn)原理：油鏡的原理三、儀器與試劑：

標本片：細菌三形片、鞭毛裝片、芽孢裝片、莢膜裝片四、實訓(xùn)方法

1、實訓(xùn)步驟（簡明清晰）：油鏡的使用方法2、操作關(guān)鍵點：

3、可能存在問題及解決方案：

五、實訓(xùn)結(jié)果（任意兩張片）40分/片標本名稱放大倍數(shù)教師評分六、思考題:油鏡使用注意事項。七、實訓(xùn)總結(jié)：（實訓(xùn)結(jié)束后完成）

分析實訓(xùn)過程的收獲、存在的問題和解決的方法

廣東食品藥品職業(yè)學(xué)院微生物與免疫學(xué)實訓(xùn)報告班級：學(xué)號：姓名：日期：

實訓(xùn)三細菌染色法

一、實訓(xùn)目的：見實驗教材二、實訓(xùn)原理（簡潔明了）三、儀器與試劑（主要的）

菌種：枯草芽孢桿菌：用于單染色

大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌：每位同學(xué)選其中

的一種用于革蘭染色。

四、實訓(xùn)方法

1、實訓(xùn)步驟（簡明清晰）：（1）單染色法：（2）革蘭染色法：2、操作關(guān)鍵點：

3、可能存在問題及解決方案：

五、實訓(xùn)結(jié)果（單染色30分；革蘭染色50分）菌名顏色革蘭染色性放大倍數(shù)教師評分單染:枯草芽×孢桿菌六、思考題：1和2七、實訓(xùn)總結(jié)：（實訓(xùn)結(jié)束后完成）

分析實訓(xùn)過程的收獲、存在的問題和解決的方法

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